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液相色谱仪的使用常识

2022年05月05日 11:51:59人气：479来源：上海奥析科学仪器有限公司

　　液相色谱仪是利用混合物在液-固或不互溶的两种液体之间分配比的差异，对混合物进行先分离，而后分析鉴定的仪器。今天小编来具体介绍一些液相色谱仪的使用常识，希望可以帮助用户更好的应用产品。

　　贮液瓶的日常维护

　　清洁是保持流动相贮液瓶正常使用的关键，使用LCMS级的溶剂和试剂。陈旧的流动相和用久了的试剂应定期废弃，防止生长微生物和组分改变。贮液瓶内壁定期清洗，流动相滤头定期清洗或更换。

　　液相泵的日常维护

　　泵的密封圈是zui易磨损的部件，密封圈的损坏可能引发漏液或剧烈压力波动;单向阀的正常工作至关重要，它若发生故障，将直接影响流速的稳定性。

　　日常维护应注意以下几点：

　　①使用LCMS级的溶剂和试剂;

　　②确保系统压力在正常范围;

　　③使用完缓冲液体系后用纯水冲洗干净，防止盐沉积，系统不运行时应存储在无缓冲液的溶液或有机溶剂中;

　　④密封圈按照各个生产厂商的建议定期更换。

　　进样器的日常维护

　　样品预处理对于防止进样针和进样阀堵塞至关重要。

　　预处理常用方法：

　　①超滤;

　　②溶剂萃取/去盐;

　　③固相萃取;

　　④灌注净化/去盐;

　　⑤色谱分离;

　　⑥甲醇或乙腈沉淀蛋白;

　　⑦酸水解，酶解;

　　⑧衍生化。

　　色谱柱的维护和保存

　　①每次工作结束，用高比例强溶剂冲洗色谱柱，冲去留在柱上的强吸附组分;

　　②净化样品，样品中的微粒会进入色谱柱，在柱头上沉积下来，造成柱压升高，柱效降低;

　　③避免撞击色谱柱，如掉落或超声震荡;

　　④柱压避免急剧变化;

　　⑤反相柱C18应保存在纯有机相或50%有机相中，一周不用要卸下，两端用堵头密封，避免干枯。

　　流动相的选择

　　LCMS常用的流动相为甲醇、乙腈、水和它们不同比例的混合物以及一些易挥发盐的缓冲液，如甲酸铵、乙酸铵等，还可以加入易挥发酸碱如甲酸、乙酸或氨水等调节pH值;LCMS体系要避免使用含磷或氯的缓冲液，含钠和钾的成分必须<1mmol/l。(盐分太高会抑制离子源的信号和堵塞喷雾针及污染接口)含甲酸(或乙酸)<2%，含三氟乙酸<0.5%，含三乙胺<1%，含醋酸铵<10—5 mmol/l。

　　样品的预处理

　　从保护仪器角度出发，防止固体小颗粒堵塞进样管道和喷雾针，防止污染MS,降低分析背景，排除对分析结果的干扰;从ESI电离得过程分析看，电荷聚集在液滴的表面，样品和杂质在液滴表面相互竞争，不挥发物(如磷酸盐等)妨碍带电液滴挥发，大量杂质妨碍带电样品离子气化，增加电荷中和的可能。

关键词：液相色谱

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